新冠疫情發(fā)生以來(lái)，核酸檢測(cè)成為了一個(gè)高頻詞，核酸檢測(cè)陽(yáng)性是確診新冠肺炎的重要標(biāo)準(zhǔn)。核酸檢測(cè)的原理到底是什么？核酸檢測(cè)為什么會(huì)出現(xiàn)假陰性？除了核酸檢測(cè)，還有哪些技術(shù)可以檢測(cè)新冠病毒呢？

 

01

 

揭秘新冠病毒核酸檢測(cè)原理

 

核酸檢測(cè)其實(shí)是檢測(cè)受測(cè)者體內(nèi)是否有新冠病毒的核酸（RNA）。每種病毒的核酸內(nèi)部都含有核糖核苷酸，不同的病毒所含的核糖核苷酸數(shù)量和排列順序不同，使得每種病毒都具有特異性。

 

新冠病毒的核酸也是獨(dú)特的，核酸檢測(cè)就是對(duì)新冠病毒的核酸進(jìn)行特異性檢測(cè)。在進(jìn)行核酸檢測(cè)之前，需要采集受測(cè)者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本，對(duì)這些樣本進(jìn)行檢測(cè)，就可以發(fā)現(xiàn)受測(cè)者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸檢測(cè)常用的是咽拭子樣本檢測(cè)，將樣本裂解提純，從中提取出可能存在的新冠病毒核酸，檢測(cè)的準(zhǔn)備工作就做好了。

 

 

新冠病毒核酸檢測(cè)主要用熒光定量RT-PCR技術(shù)，這種技術(shù)是熒光定量PCR技術(shù)與RT-PCR技術(shù)的結(jié)合。在檢測(cè)過(guò)程中，先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核酸（DNA）；再采用熒光定量PCR技術(shù)，將得到的DNA進(jìn)行大量復(fù)制，同時(shí)，使用特異性探針對(duì)復(fù)制得到的DNA進(jìn)行檢測(cè)，打上標(biāo)記。如果存在新冠病毒核酸，儀器就可以檢測(cè)到熒光信號(hào)，而且，隨著DNA的不斷復(fù)制，熒光信號(hào)不斷增強(qiáng)，這樣就間接檢測(cè)到了新冠病毒的存在。

 

 

 

（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）

 

02

 

為什么會(huì)出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象

 

假陰性，就是指被檢測(cè)者已經(jīng)感染了新冠病毒，但是卻沒(méi)有檢測(cè)出病毒核酸，即核酸檢測(cè)為陰性。如果一個(gè)受測(cè)者沒(méi)有出現(xiàn)相關(guān)癥狀，核酸檢測(cè)又為陰性，就很容易讓他放松警惕，可能帶來(lái)更大范圍的病毒傳播，這也是新冠病毒的狡猾之處。

 

出現(xiàn)假陰性的原因主要有以下三方面：

 

第一，原始檢測(cè)標(biāo)本中新冠病毒核酸含量過(guò)低，低于能被檢測(cè)到的下限。這與所采集樣本的類型和采集的時(shí)機(jī)等都有關(guān)系。

 

第二，如果新冠病毒核酸與探針結(jié)合的部位發(fā)生變異，可能影響檢測(cè)中探針的結(jié)合效率，導(dǎo)致熒光信號(hào)檢測(cè)不到。

 

第三，假陰性也和檢測(cè)技術(shù)的靈敏度有關(guān)。疫情發(fā)生初期，應(yīng)用于臨床的試劑盒不夠成熟、靈敏度不夠高，關(guān)于假陰性的報(bào)道頻出。后來(lái)，隨著技術(shù)水平的提高，檢測(cè)的準(zhǔn)確率迅速提高，假陰性率不斷降低。

 

03

 

核酸檢測(cè)為陽(yáng)性就是確診了嗎

 

核酸檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，就可以確認(rèn)受測(cè)者上呼吸道存在病毒核酸，但并不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測(cè)為陽(yáng)性的情況下，還要綜合流行病學(xué)史對(duì)受測(cè)者進(jìn)行進(jìn)一步的診斷，如果受測(cè)者還有發(fā)熱、咽痛、咳嗽、乏力等癥狀，以及與已確診的感染者有接觸史等，就可以診斷為確診病例。

 

如果受測(cè)者沒(méi)有任何相關(guān)癥狀，一般診斷為無(wú)癥狀感染者。無(wú)癥狀感染者也有傳染性，而且一些無(wú)癥狀感染者后來(lái)也開(kāi)始出現(xiàn)癥狀，變成了確診患者。

 

04

 

其他檢測(cè)新冠病毒的技術(shù)

 

對(duì)受測(cè)者來(lái)說(shuō)，從標(biāo)本中分離出病毒是最權(quán)威的確診依據(jù)，但是，分離病毒是比較危險(xiǎn)的操作，需要在高防護(hù)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，而且耗時(shí)比較長(zhǎng)、成本較高。一般醫(yī)療機(jī)構(gòu)不具備這個(gè)條件，他們大多會(huì)采取檢測(cè)血液中是否有病毒抗體的方法，來(lái)判斷受測(cè)者是否感染了病毒，乙肝、艾滋病等都是通過(guò)這種方式進(jìn)行檢測(cè)的。

 

新冠病毒也可以通過(guò)這種免疫學(xué)檢測(cè)的方法檢測(cè)出來(lái)。面對(duì)新冠病毒的入侵，人體會(huì)進(jìn)行“反抗”，產(chǎn)生特異性抗體IgM和IgG（免疫球蛋白M和免疫球蛋白G）。如果在受測(cè)者血液中檢測(cè)出這兩種特異性抗體，就可以說(shuō)明受測(cè)者感染了新冠病毒。

 

怎么檢測(cè)抗體呢？常用的是化學(xué)發(fā)光免疫分析法，也就是使用化學(xué)發(fā)光劑或特定的酶標(biāo)記抗體或抗原，發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物，洗滌后再加入發(fā)光劑，如果受測(cè)者血液中存在IgM和IgG這兩種特異性抗體，化學(xué)發(fā)光儀就能檢測(cè)到發(fā)光信號(hào)。這種化學(xué)發(fā)光免疫分析法，是目前最先進(jìn)的免疫檢測(cè)技術(shù)之一。它靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)范圍寬、出結(jié)果快，但檢測(cè)成本較高。

 

此外，由于人體感染病毒后需要一定時(shí)間才能產(chǎn)生抗體，只有等抗體產(chǎn)生后才能檢測(cè)到，這也導(dǎo)致抗體檢測(cè)的時(shí)效性不強(qiáng)。乙肝、艾滋病等感染后需要2～3周才能產(chǎn)生抗體。新冠病毒感染后需要3天以上才能檢測(cè)到IgM抗體，需要一周以上才能檢測(cè)到IgG抗體。

 

所以，為了盡快抓住新冠病毒的尾巴，應(yīng)用更多的是核酸檢測(cè)，它可以更早發(fā)現(xiàn)新冠病毒的蹤跡。

 

(本文來(lái)自：中國(guó)數(shù)字科技館,原題《核酸檢測(cè)的原理到底是什么？為什么會(huì)出現(xiàn)假陰性？》）